二氧化碳培养箱与气体钢瓶应该如何连接呢?首先在钢瓶上面连接减压阀(用培养箱专用阀门),再用软管连接到二氧化碳培养箱的CO2气体进口,软管两端用专用卡子固定好,钢瓶阀门开之前,必须确保减压阀完全关闭。钢瓶阀门打开之后,再开减压阀的小阀门,调节好压力,具体的要控制压力要设置在合理的压力范围内。
二氧化碳培养箱一般使用的压力都不会很高,培养箱都很娇贵的,所以一定要先调好减压阀出口的压力后再连接二氧化碳培养箱。二氧化碳减压阀装在钢瓶上面后,逆时针打开钢瓶总开关,减压阀右侧表显示钢瓶内压力,观察高压表读数,记录高压瓶内中的二氧化碳压力,压力很低表示二氧化碳量少,需重新充入二氧化碳,压力正常后,将减压阀出厂配置的调节手轮插入减压阀正面凸出凹洞处,顺时针缓慢转动减压阀调节螺杆,使其压缩主弹簧将活门打开,减压阀左侧表显示出气压力,这样进口的高压气体由高压室经节流减压后进入低压室,并经出口通往CO2培养箱。一般情况下,二氧化碳培养箱需要的压力在0.03Mpa – 0.06Mpa范围内,也有用到0.1Mpa的,需要根据实际情况而定。
仔细检查连接部位是否漏气,将肥皂液涂到连接处进行检查,如有气泡则调节连接,确认不漏气后进行实验。
使用完后,先顺时针关闭钢瓶总开关,再逆时针旋松减压阀。
注意事项
防止钢瓶的使用温度过高。钢瓶应存放在阴凉、干燥、远离热源(如阳光、暖气、炉火)处,不得超过31℃,以免液体CO2温度的升高,体积膨胀而形成高压气体,产生爆炸危险。
钢瓶千万不能卧放。如果钢瓶卧放,打开减压阀时,冲出的CO2液体迅速气化,容易发生导气管爆裂及大量CO2泄漏的意外。
减压阀、接头及压力调节器装置正确连接且无泄漏,没有损坏、状况良好。
CO2不得超量填充。液化CO2的填充量,温带气候不要超过钢瓶容积的75%,热带气候不要超过7%。
旧瓶定期接受安全检验。超过钢瓶使用安全规范年限,接受压力测试合格后,才能继续使用。
气瓶放气或开启减压阀时动作必须缓慢。如阀门开启速度过快,减压阀工作部分的气体因受绝热压缩而温度大大提高,这样有可能使有机材料制成的零件如橡胶填料、橡胶薄膜纤维质衬垫着火烧坏,并可使减压阀完全烧坏。另外,由于放气过快产生的静电火花以及减压阀有油污等,也会引起着火燃烧烧坏减压阀零件。
减压阀安装前及开启气瓶阀时的注意事项:安装减压阀之前,要略打开氧气瓶阀门,吹除污物,以防灰尘和水分带入减压阀。在开启气瓶阀时,瓶阀出气口不得对准操作者或他人,以防高压气体突然冲出伤人。减压阀出气口与气体橡胶管接头处必须用退过火的铁丝或卡箍拧紧;防止送气后脱开发生危险。
如长期不使用CO2时,应将CO2开关关闭,防止CO2调节器失灵。
抢先看!二氧化碳培养箱使用前的基本培训
二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境,培养箱要求稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。采用进口红外线CO2传感器,控制精度准确稳定,不受温度和湿度影响等特点。是细胞、组织、细菌培养的一种先进仪器,是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备。 二氧化碳培养箱的内部与环境完全隔绝,以确保设备内部的空气不受外界因素的影响。为了使实验室技术人员能够在生长阶段仍能够观察样品,大多数培养箱都配备了玻璃门以及常规门,该门提供了额外的防污染保护。内部由防锈材料制成,如不锈钢,并且应尽可能少的尖锐边缘和凹槽,以避免污染可能隐藏的地方。特别是在细胞培养的敏感领域,只有一种细菌会破坏数周的工作。进入的空气流过无菌过滤器,必须均匀分布在整个内部,因为样品通常位于不同高度的货架上。挑战在于通过整个内部产生的均匀性,以确保CO2的均匀供给在恒定的气候和湿度条件下的所有样本。 实验室内往往众多实验人员共用一台培养箱,难免有人为操作失误,都会增大交叉污染的风险,因此应对所有实验人员进行二氧化碳培养箱的使用培训。需要注意以下几点: 一、设备使用培训: 使用培养箱前必须着个人防护装备,按照实验室生物安全等级要求实施实验室管理规范、无菌操作方法、标准操作流程(SOP)。 实验服袖口需扎进手套内,未扎进的袖口可能接触到洁净的培养基,会增加交叉污染的风险,另外裸露皮肤上的可能潜在的污染源也会增加交叉污染的风险; 手套使用前用70%常用消毒剂消毒; 培养瓶、培养盘、培养皿等在放入
二氧化碳培养箱前需做好标记; 从箱子后部依次往前摆放培养基,以免早放置的被过多干扰; 近期需要取出的材料放至靠近箱门处并做好标记; 带盖的长颈瓶应远离箱门以避免交叉污染; 避免堆叠太多培养基; 避免干扰细胞生长尽量少开箱门; 二、人员操作培训: 建立完善的实验室管理规范; 新进实验员应建立培训流程; 实验室内应定期或不间断进行操作培训; 做好详尽的文件记录,文件记录不仅单纯的记录实验室事件,对
二氧化碳培养箱定期维护、实验数据查找都能起到很好的提示和记录,比如提示每周检查过滤器、记录开门频率对细胞生长的影响。
以上就是关于二氧化碳培养箱使用前的培训,做到这些可大大的减少人为操作的失误,提率。
二氧化碳培养箱水盘污染控制问题
二氧化碳培养箱内通常采用两种方式控制箱体内湿度。一是采用被动控湿法,即通常的二氧化碳培养箱内均放置一个3L的水盘,内盛3L无菌纯水,37度的温度,水自然蒸发,使箱体内湿度达到95%。二是一些高级的二氧化碳培养箱,采用主动加湿系统(蒸汽发生器,加热水盘,喷雾器等),可以 控制箱体内的湿度,如低温培养时(低温二氧化碳培养箱)就需要主动加湿的方法。 水盘污染控制问题:这种高湿度条件下,放置在箱体内部的水盘中的纯净水,很容易造成微生物的滋生,产生污染,导致细胞培养完全失败。 目前,控制水盘内污染的方法有如下几种: 1、定期(至少每两周一次),更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。 2、在水盘内添加适量硫酸铜,配制方法:20g无水硫酸铜+5ml浓硫酸+1L灭菌纯水。 3、夏季气温高时,水盘里加0.02%的叠氮钠可以有效的预防真菌污染。 4、水盘内添加适量抗生素。 5、定期为培养箱(含水盘)进行一次高温灭菌。 6、使用专用的水盘污染控制试剂,如市面上有些CO2培养箱厂家提供水盘污染控制专用的银离子消毒盒,说明书上描述能有效杀灭600中微生物,能持续使用6个月,但此类专用污染控制试剂较常规方法,存在价格较昂贵缺点。采用主动加湿的方式就不存在污染问题。