高效液相色谱仪的操作和操作注意事项,液相色谱性能特点

【导读】高效液相色谱仪是在经典液相柱色谱仪的基础上，引入了气相色谱仪的理论，采用了高压输液泵、高效固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器，具有高压、高速、高效、高

高效液相色谱仪是在经典液相柱色谱仪的基础上，引入了气相色谱仪的理论，采用了高压输液泵、高效固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器，具有高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点。

操作步骤：

1、打开电脑

2、打开主机、预热

3、进入仪器工作站，联机并设定仪器使用方法及仪器参数

4、启动泵的动力系统预处理(排气等)

5、检查是否漏夜、柱压是否正常

6、设置仪器方法，包括仪器的使用条件等

7、激活操作方法，等待仪器平衡、基线平直

8、仪器出现“Ready”后可进行样品分析

9、操作测试结束后，清理所有实验材料，做好清洁卫生

10、记录仪器使用日志，并与管理员办理交接手续

使用注意事项:

1、高效液相色谱的流动相应采用色谱纯溶剂，以满足仪器要求、避免损坏色谱柱;

2、严禁使用有污染的水等冲洗色谱柱，避免将互不相溶的溶剂一同进入泵内;

3、流动相需经过滤、除气后方可使用;

4、待分析的样品必须彻底溶解澄清、过滤，以避免堵塞、损坏色谱柱;

5、分析完成后，须注意及时清洗色谱柱和检测器的比色池。

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高效液相色谱的几大特点

　　高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（*高输送压力可达4、9~107Pa）；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。

　　特点

　　1、高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～350×105Pa。

　　2、高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h。

　　3、高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。

　　4、高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外，用样量小，一般几个微升。

　　5、适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75%～80%）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。